摘要:目的探讨重组腺病毒介导的大鼠增殖抑制基因(rHSG)对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后基底动脉(BA)迟发型脑血管痉挛(DCV)的影响。方法SD大鼠156只随机分为5组:SAH组(A组,36只)、SAH+Adv-rHSG-GFP组(B组,36只)、SAH+Adv-GFP组(c组,36只)、假手术组(D组,36只)和正常对照组(E组,12只)。采用枕大池二次注血法建立大鼠SAH模型,假手术组注射等量生理盐水。将重组腺病毒Adv-rHSG-GFP及空载腺病毒Adv-GFP分别转染B、C组大鼠BA。设立4d、7d、10d3个观测点,HE染色后测量BA内径周长及血管壁厚度,观察血管结构改变;免疫组化染色后检测BA中rHSG蛋白表达;用RT-PCR法检测BA中rHSGmRNA表达。结果A、C组各时相BA有不同程度的内膜增厚皱折、平滑肌层增厚等增殖性改变。与A组及C组相比,B组7d、10d时BA血管痉挛明显缓解,且rHSG蛋白及mRNA表达明显增强(P<0.01)。结论rHSG的过表达可以减轻SAH后血管壁的增殖和DCV,为外源性rHSG基冈治疗DCV提供了实验依据。
   
   关键词:大鼠;蛛网膜下腔出血;迟发性脑血管痉挛;大鼠增殖抑制基因;增殖细胞核抗原
   
   
   3讨论
   DCV是十分复杂的病理生理学过程,探索新的预防及治疗方法对于降低SAH患者的死亡率、残疾率具有重大的意义。过去研究表明DCV是多种因素如氧合血红蛋白(oxyHb)、内皮素-1(ET-1)、PKc激酶、免疫炎症反应以及补体复合物成分等综合作用的结果,但不能做出较为满意的解释。近年来,一些学者认为SAH后DCV的发生是血管壁结构改变的结果,其中血管平滑肌细胞增殖尤为重要。
   rHSG被证实有抑制血管细胞的增殖、迁移和重塑的作用。前期实验证明,大鼠SAH后4~16d,BA血管壁rHSGmRNA相对表达量降低,以SAH后7d最为明显,提示rHSG和SAH后DCV有密切关系。本实验用重组腺病毒Adv-rHSG-GFP转染SAH大鼠BA,旨在探讨外源性rHSG对SAH后DCV的影响。结果显示,外源性rHSG在大鼠SAH后第7d表达量最高,在SAH后第10d下降至第4d水平,明显减轻了DCV的程度,表明外源性rHSG在BA中表达持久,采用基因治疗有足够的时间窗,为临床预防和治疗SAH后DCV提供了实验依据。