[摘要]:目的构建基因真核表达载体并探讨MIER3对结直肠癌细胞生物学特性的影响,应用生物信息学方法对MIER3及其相互作用蛋白进行预测分析。方法应用Real-timePCR及Westernblot方法检测MIER3在8例结肠癌及相应癌旁正常组织中mRNA和蛋白表达水平的差异表达。结论MIER3与结直肠癌增殖、侵袭密切相关,为进一步深入阐明MIER3在结直肠癌发生发展中的作用奠定基础。
   
   [关键词]:MIER3;增殖;侵袭;生物信息学
   
   3讨论
   我们通过对MIER3在结直肠癌组织中的表达进行初步检测,证实MIER3在结直肠癌组织中出现异常的表达下调,提示MIER3与结直肠癌发生发展密切相关。同时,我们通过克隆构建真核表达载体,利用体外过表达功能实验检测发现MIER3表达上调后可明显抑制结直癌细胞株的增殖及侵袭能力。这些发现提示MIER3在结直肠癌中可能具有抑癌基因的特点,MIER3的表达失调可能在结直肠癌发生演进中承担着重要生物学功能。进一步,我们应用基于保守的蛋白质相互作用的生物信息学预测方法,通过查询模式生物黑腹果蝇的蛋白数据库,初步确定NAT9为MIER3的候选相互作用蛋白。NAT9是N-乙酰基转移酶超家族(NAT)成员之一,NAT家族是人体内重要的Ⅱ相代谢酶,在人体对芳香胺类致癌物质的活化及灭活以及某些药物的代谢过程中起着重要作用,其活性存在遗传多态性,并与肿瘤的易感性密切相关。
   综合上述实验结果与分析,我们推测MIER3与结直肠癌发生发展密切相关,MIER3的表达失调和功能异常在结直肠癌的发生演进中可能承担着重要角色,MIER3在结直肠癌中的具体功能及相关机制值得进一步深入研究。